### 人胃癌细胞MGC803培养指南

尊龙凯时人生就博为您提供详细的人胃癌细胞MGC803的培养说明，包括细胞培养条件、处理流程和注意事项等内容。

#### 一、细胞培养条件

细胞名称：人胃癌细胞MGC803

生长特性：贴壁生长

冻存条件：无血清冻存液（货号：C7001）

培养体系：1640培养基 + 10% FBS + 1% P

传代方法：第一次建议1:2传代。传代后每2天更换培养基。

备注：使用无菌离心管收集培养基，进行对比培养。如果对比效果不佳，建议直接使用我们的完全培养基。

#### 二、细胞处理步骤

收到细胞后，应尽快培养至良好状态，灌满完全培养液并封好瓶口，以确保细胞运输后的最佳状态。首先，使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，然后在超净台内进行无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时，以便稳定细胞状态。使用显微镜观察细胞生长情况，并拍摄保存不同倍数的照片（建议40x、100x及200x各一张）。前三天的照片为售后重要依据，如未提供照片则默认收到状态良好。

#### 三、细胞培养步骤

a. 细胞传代：当细胞未超过80%汇合度时，收集培养液至离心管中，并留5ml培养基于37℃、5% CO2环境中培养；如果细胞密度已超过80%，则可进行传代。具体步骤如下：

1. 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，放入37℃培养箱消化1-2分钟，观察细胞消化状态，若细胞大部分变圆并脱落，迅速返回操作台，轻敲培养瓶后添加5ml完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞使其完全脱落后吸出，转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃上清液后加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例进行分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO2的细胞培养箱培养。

b. 细胞冻存：当细胞覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液并用PBS清洗细胞一次；添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞回缩后添加5ml完全培养液终止消化，收集悬液并离心5分钟。弃去上清后，加入1ml无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转移至冻存管，最后直接放入-80℃冰箱中。必要时，可在-80℃保存24小时后再转入液氮罐中。

c. 细胞复苏：从液氮中取出细胞冻存管，快速置于37℃水浴中解冻，直至无结晶，然后用75%酒精擦拭管壁；将细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，离心5分钟后弃上清，重悬并接种至T25培养瓶中，放于37℃、5% CO2培养箱内继续培养。第二天，更换为新鲜完全培养基。

#### 四、注意事项

在运输过程中，细胞可能会因粘附不牢而发生脱落，属于正常现象。如脱落较多，请将所有培养液收集至离心管，离心后重悬，终止消化后则应分瓶传代继续培养。

#### 五、售后条款

如细胞出现问题，尊龙凯时人生就博承诺在符合条件的情况下可重发细胞。常见的重发情况包括运输途中问题、细胞污染等，并需在规定时间内提供实验结果和照片以便核实。对于客户因不当操作引起的问题，我方将不予重发。

通过遵循以上培养指南，您将有效管理人胃癌细胞MGC803的生命过程。如需进一步支持，欢迎随时咨询尊龙凯时人生就博。我们致力于为您提供高质量的生物医学服务。