### 实验方法原理

本染色技法为基础性的染色方式，适用于细菌标本涂片和菌落涂片的检测。通过此染色，细菌可被区分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。

### 实验步骤

#### 一、实验试剂

1. **结晶紫溶液**：     A液：结晶紫 2g，95%乙醇 20ml。     B液：草酸铵 0.8g，蒸馏水 80ml。     混合A液与B液后，需在使用前24小时过滤并装入试剂瓶内备用。

2. **碘液**：     碘 1g，碘化钾 2g，蒸馏水 300ml。     将碘与碘化钾研磨混合，加入少量水以帮助溶解，最终加水至300ml。

3. **脱色液**：95%乙醇。

4. **复染液**：     A贮存液：沙黄 25g，95%乙醇 100ml。     B应用液：A液 10ml，蒸馏水 90ml。

#### 菌片制备

染色的第一步是制作涂片。使用接种环蘸取菌液点于载玻片上，标本可直接涂布在玻片上。在制作菌落涂片时，需要用接种针挑去菌落，并在盐水中涂布。操作过程中应轻柔，以免改变菌细胞的排列或导致细菌鞭毛脱落，从而影响结果的准确性。制备的涂片应自然干燥后经火焰固定，需注意固定温度不宜过高，以保证细胞形态稳定。固定之后，便可进行染色。

#### 二、染色方法

1. 将涂片经火焰固定后，加结晶紫液染色1分钟，然后用清水冲去染液。

2. 加碘液染色1分钟，进行水洗。

3. 使用脱色液，不时轻摇约30秒，直至无紫色脱落为止，随后水洗。

4. 加入复染液，染色30秒，最后水洗。

5. 干燥后进行显微镜观察。

通过以上方法，您可以有效分辨细菌类型，精准鉴定样本。让我们携手**尊龙凯时人生就博**，提升生物医疗领域的研究水平！